8月2日，湖北大學生命科學學院、省部共建生物催化與酶工程國家重點實驗室吳姍教授團隊與浙江大學醫學院郭江濤教授團隊、楊帆教授團隊合作，在國際重要學術期刊Nature在線發表題為“Structures and mechanisms of the Arabidopsis auxin transporter PIN3”（擬南芥生長素轉運蛋白PIN3的結構和機製）的研究論文。該研究報道了擬南芥PIN3（AtPIN3）在apo狀態、生長素吲哚乙酸IAA結合狀態和NPA結合狀態下的3個高分辨率冷凍電鏡結構，為理解PIN介導生長素轉運和NPA抑製生長素極性運輸的分子機製提供了結構基礎，進而為靶向該轉運體的創新農藥研發打下基礎。這是湖北大學首次以通訊單位在Nature發表研究論文。

　　生長素是最重要的一類植物激素，對植物生長發育起核心調控作用。在種子植物中，生長素主要通過極性運輸或者維管係統進行運輸。PIN家族蛋白介導生長素外排，是承擔植物體生長素極性運輸的最重要的轉運蛋白。PIN突變體會影響PIN極性定位和活性，從而導致生長素分布失衡。NPA（N-1-naphthylphthalamic acid）是一種除草劑，也是生長素極性運輸的抑製劑。長期以來，人們對PIN如何介導生長素的外排，以及NPA如何抑製生長素的極性運輸的分子機製尚不清楚。研究人員通過單顆粒冷凍電鏡技術，解析了AtPIN3在apo狀態、NPA結合狀態以及IAA結合狀態下的高分辨率結構。三個結構類似，且均為向內開放狀態（圖1b,c, f）。AtPIN3NPA和AtPIN3IAA複合物結構清楚地揭示了NPA、IAA與AtPIN3的結合模式。NPA與IAA的結合模式類似（圖1d, e, g, h），抑製劑NPA和底物IAA的結合位點重疊，揭示了NPA抑製生長素極性運輸的分子機製：NPA作為競爭性抑製劑，直接占據生長素在PIN上的結合位點，並抑製了轉運過程中PIN的潛在構象變化。

　　隨後，為了進一步驗證IAA和NPA在AtPIN3中的結合模式，研究人員對AtPIN3上與IAA和NPA有相互作用的殘基進行了點突變，並在體外放射性3H-IAA轉運實驗體係中檢驗其功能。 此外，研究人員將野生型AtPIN3和突變體進行表達純化，通過表麵等離子體共振技術（SPR），測定了AtPIN3分別與IAA和NPA的解離常數（KD）。兩者實驗結果進一步驗證了冷凍電鏡結構中觀察到的IAA和NPA與AtPIN3的結合模式。本文係統性地解析了AtPIN3在apo狀態、底物（IAA）結合狀態以及抑製劑（NPA）結合狀態下的高分率結構，揭示了AtPIN3的結構、IAA識別機製及NPA抑製的分子機製，將有力促進對PIN介導的生長素運輸分子機製的理解。

　　據悉，湖北大學與浙江大學為本文共同通訊單位，郭江濤教授、吳姍教授和楊帆教授為共同通訊作者，浙江大學醫學院博士後蘇楠楠、博士生竺愛琴和湖北大學生命科學學院博士生陶鑫為共同第一作者，參與這項工作的還有湖北大學生命科學學院馬立新教授等。

　　吳姍教授2019年初加入湖北大學，負責搭建湖北大學冷凍電鏡平台。本文為湖北大學冷凍電鏡平台2021年7月正式運行以來第一篇在線發表的高水平文章。吳姍教授團隊長期從事生物大分子的精細結構解析與相關分子機製研究，在Nature、Science、Nature Structural & Molecular Biology、Nature Communications等國際知名期刊上發表多篇高水平文章。本研究工作受國家自然科學基金委、國家重點研發計劃等資助。(beplay2網頁登錄 來源：湖北大學生命科學學院)